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熒光分光光度計如何來測定維生素B2的含量?
更新時間:2017-07-19 點擊次數:2653
 一、儀器和試劑   
(1)儀器 熒光光度計、四面通石英比色皿一個:1cm 、1和2 mL刻度移液管各一支、吸耳球、洗瓶、鏡頭紙。   
(2)試劑 10.0μg/ml維生素B2標準溶液、二次蒸餾水 
二、實驗步驟   
(1). 打開氙燈,再打開主機,然后打開計算機啟動工作站并初始化儀器,預熱30min  
(2) 儀器初始化完畢后,在工作界面上選擇測量項目,設置適當的儀器參數:設置發(fā)射波長為540 nm,在200~500范圍內掃描,紀錄熒光發(fā)射強度和激發(fā)波長的關系曲線,便得到激發(fā)光譜。從激發(fā)光譜圖上可以找出其zui大激發(fā)波長為440nm   
(3)標準溶液及樣品的熒光測定      
將激發(fā)波長固定在440nm,熒光發(fā)射波長為540nm。測量上述系列標準維生素Bz溶液的熒光發(fā)射強度。以溶液的熒光發(fā)射強度為縱坐標,標準溶液濃度為橫坐標,制作標準曲線。      
在同樣條件下測定未知溶液的熒光強度,并由標準曲線確定未知試樣中維生素Bz的濃度,計算藥片中的維生素Bz的含量。  
(4)退出主程序,關閉計算機,先關主機,zui后關氙燈。

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